宮頸癌是公認(rèn)的唯一發(fā)病機(jī)理明確、癌前病變周期較長(zhǎng)、可以預(yù)防和阻斷的惡性腫瘤，如果早期發(fā)現(xiàn)和治療癌前病變，子宮頸癌的預(yù)防和治愈率幾乎接近100%[1]。今年第二十一次全國(guó)子宮頸癌協(xié)作組工作會(huì)議明確提到——現(xiàn)有許多研究表明，p16/ki-67、宮頸癌基因甲基化等檢測(cè)方法，在宮頸癌初篩陽(yáng)性后的精細(xì)分流管理中將發(fā)揮核心作用，這也預(yù)示了宮頸癌篩查策略未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)。
迪安生物近日新上市P16/Ki-67檢測(cè)試劑盒（免疫細(xì)胞化學(xué)法）（浙杭械備20240533、浙杭械備20240534），自有免疫組化平臺(tái)可實(shí)現(xiàn)原位雜交（EBER）以及細(xì)胞雙染的完整試驗(yàn)，為實(shí)驗(yàn)室與醫(yī)院提供包含HPV檢測(cè)試劑、TCT檢測(cè)產(chǎn)品等多樣選擇。
1. 宮頸癌篩查方法：傳統(tǒng) VS. 雙染
宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)由宮頸不典型增生連續(xù)發(fā)展至宮頸癌的過(guò)程，高危型 HPV 持續(xù)性感染是宮頸癌及其癌前病變發(fā)生的主要原因[2]。宮頸癌早期或無(wú)明顯特異性癥狀，難以經(jīng)臨床表現(xiàn)進(jìn)行早期篩查，且癌前病變時(shí)期較長(zhǎng)。因此，早期篩查的準(zhǔn)確性對(duì)宮頸癌的診療及預(yù)防具有較高價(jià)值。
傳統(tǒng)檢測(cè)方法
1950年以來(lái)普遍采用宮頸巴氏涂片進(jìn)行宮頸癌篩查，早期病變檢出率已明顯提升，但診斷準(zhǔn)確度仍不理想，有文獻(xiàn)報(bào)道巴氏涂片的假陰性率至少為15%～20%[3]，Joseph等報(bào)道巴氏涂片的假陰性率甚至高達(dá)53%[4]，主要原因是涂片中有診斷意義的細(xì)胞太少。傳統(tǒng)巴氏涂片制片時(shí)刮板上的細(xì)胞只有少量被轉(zhuǎn)移到玻片上，且可能存在細(xì)胞范圍不全、細(xì)胞重疊、背景不清等情況。
隨著醫(yī)療技術(shù)發(fā)展，目前宮頸癌篩查主要采用宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查（fluid based thin-layer cytological test，TCT）、人乳頭瘤病毒( human papilloma virus，HPV)檢測(cè)，或兩者聯(lián)合篩查。
迪安生物TCT檢測(cè)產(chǎn)品
TCT和HPV檢測(cè)均存在相對(duì)不足，如宮頸液基細(xì)胞學(xué)篩查無(wú)明確意義的非典型鱗狀細(xì)胞(atypical squamous cells of undermined significance，ASC-US)診斷過(guò)多[5]，HPV檢測(cè)難以排除一過(guò)性感染的影響，對(duì)于人口眾多的地區(qū)和國(guó)家，檢測(cè)特異性不高，將帶來(lái)后續(xù)大量的臨床工作[6]。p16/Ki-67免疫細(xì)胞化學(xué)雙染法則可有效彌補(bǔ)HPV檢測(cè)的低特異度及細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的低靈敏度，降低漏診及不必要的陰道鏡檢查。
細(xì)胞雙染檢測(cè)方法
早在2011年，臨床上就提出采用 p16 與 Ki-67 免疫細(xì)胞化學(xué)雙染的方法來(lái)發(fā)現(xiàn)高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(high-grade intraepithelial neoplasia，HSIL)和子宮頸鱗狀細(xì)胞癌 (squamous cell carcinoma，SCC)。商業(yè)化雙染試劑盒的出現(xiàn)，使這一技術(shù)在國(guó)內(nèi)宮頸液基細(xì)胞學(xué)診斷實(shí)踐中受到關(guān)注。
多項(xiàng)研究表明p16/Ki-67免疫細(xì)胞化學(xué)雙染法具有以下優(yōu)點(diǎn)：
①針對(duì)HPV初篩陽(yáng)性分流，具備相對(duì)的特異性和靈敏度優(yōu)勢(shì)，且對(duì)不同疾病類(lèi)型總檢出率更高，能夠有效提高 HSIL陽(yáng)性檢出率[7]；
②可較好地區(qū)分細(xì)胞學(xué)陰性病灶，降低宮頸癌的漏診率及陰道鏡檢誤診率[8]；
③檢測(cè)所需樣本較易獲取，患者機(jī)體造成的損傷較小，重復(fù)性高，可避免患者發(fā)生不耐受現(xiàn)象[9]；
④對(duì)LSIL的轉(zhuǎn)歸預(yù)測(cè)有一定價(jià)值[10]；
⑤判讀不依賴(lài)形態(tài)學(xué)，所獲結(jié)果易于觀察分辨，有效減輕醫(yī)生工作負(fù)擔(dān)[11]。
綜上，p16/Ki-67細(xì)胞學(xué)雙染檢測(cè)對(duì)于宮頸癌初篩異常后的分流及管理有重要的臨床參考價(jià)值，可認(rèn)為其在HPV單獨(dú)初篩陽(yáng)性后的分流方面優(yōu)于細(xì)胞學(xué)分流。
2. 什么是p16/Ki-67免疫細(xì)胞化學(xué)雙染法？
p16
p16是一種抑癌蛋白，主要促進(jìn)E2F和pRB結(jié)合來(lái)調(diào)控細(xì)胞周期。當(dāng)細(xì)胞持續(xù)性感染HR-HPV后，其產(chǎn)生的病毒性E7蛋白會(huì)替代E2F，與pRB結(jié)合，導(dǎo)致無(wú)法形成E2F-pRB復(fù)合物，破壞細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制，導(dǎo)致細(xì)胞持續(xù)增殖，最終出現(xiàn)p16蛋白過(guò)度表達(dá)并累積。
細(xì)胞周期正常表達(dá)與失控表達(dá)示意圖
Ki-67
Ki-67是目前應(yīng)用最廣泛、最可靠的細(xì)胞增殖標(biāo)志物之一，與多種腫瘤的發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)，表達(dá)于鱗狀上皮細(xì)胞的細(xì)胞核，其高表達(dá)預(yù)示癌前病變的發(fā)生及組織惡變。
p16/Ki-67
正常細(xì)胞中p16和Ki-67表達(dá)相互排斥，若同時(shí)表達(dá)，則提示細(xì)胞周期調(diào)控失常，是高危型HPV感染的標(biāo)志，可提示較高級(jí)別病灶。
p16/ki-67雙染檢測(cè)陰性：提示樣本中未檢測(cè)到高危型HPV持續(xù)性感染引起的p16/ki-67蛋白共表達(dá)，患者遵醫(yī)囑隨訪；
p16/ki-67雙染檢測(cè)陽(yáng)性：提示高危型HPV持續(xù)性感染，與高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）相關(guān)，患者需要及時(shí)就診，在醫(yī)生的幫助下行陰道鏡檢查，避免機(jī)體內(nèi)存在癌前病變的情況。
p16/Ki-67 表達(dá)圖解
3. 金迪安?P16/Ki-67檢測(cè)試劑盒
迪安生物最新上市p16/Ki-67檢測(cè)試劑盒，有效完善宮頸癌篩查診斷方案，試劑染色結(jié)果對(duì)比明顯，色彩鮮艷，檢測(cè)結(jié)果直觀，易于判讀。
染色結(jié)果判讀示例
p16 單染：胞漿棕黃色著色為（+），表示細(xì)胞周期停止。
Ki-67 單染：胞核玫紅色著色為（+），提示細(xì)胞增值。
p16/Ki-67 雙染：在同一個(gè)細(xì)胞中核被染成紅色、漿被染成玫棕黃色，且處于同一顯微鏡焦距下，即判讀為 p16/Ki-67 雙染（+），解讀不依賴(lài)于細(xì)胞形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，一張片子顯微鏡下發(fā)現(xiàn)一個(gè)雙染色細(xì)胞即說(shuō)明雙染結(jié)果呈陽(yáng)性。
參考文獻(xiàn)
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